【摘 要】
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目的筛选并鉴定与乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)特异性结合的多肽。方法将酵母表达的HBsAg包被在微孔板上,加入噬菌体进行随机肽库筛选,经过4轮筛选后,随机挑取15个克隆进行DN
【机 构】
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厦门大学附属第一医院生殖医学科,华中科技大学同济医学院免疫学系,厦门大学附属第一医院检验科
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目的筛选并鉴定与乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)特异性结合的多肽。方法将酵母表达的HBsAg包被在微孔板上,加入噬菌体进行随机肽库筛选,经过4轮筛选后,随机挑取15个克隆进行DNA测序,并通过夹心ELISA方法鉴定其亲和力,采用剂量依赖结合实验和竞争抑制实验检测其与HBsAg结合的特异性。结果经过4轮筛选,得到一优势克隆No.3,展示肽段为SSYAPYVWQPIA,与HBsAg有较强的亲和力,剂量依赖结合实验和竞争抑制实验证明克隆No.3与HBsAg的结合是特异性的。结论利用噬菌体展示肽库技术可以获得HBsAg特异性结合肽,此多肽可以作为靶向分子用于乙型肝炎的基因治疗,为乙型肝炎的靶向基因治疗奠定实验基础。
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