观察磷酸鞘氨醇(S1P)干预对胰腺癌PANC1细胞侵袭、转移能力的影响。
方法采用20、40、80、100、150、200 nmol/L S1P干预PANC1细胞24 h,以未干预细胞作为对照组。另采用S1P特异性受体拮抗剂VPC23019 10 μmol/L预处理1 h后再应用100 nmol/L S1P干预PANC1细胞24 h(VPC+S1P组),同时设单用S1P干预(S1P组)、单用VPC23019处理(VPC组)及未处理的对照组。采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞N-Cadherin mRNA和蛋白表达,采用划痕实验和Transwell小室检测细胞的迁移、侵袭能力。
结果对照组及20、40、80、100、150、200 nmol/L S1P干预组细胞N-Cadherin mRNA表达量分别为1.000±0.061、1.240±0.106、1.547±0.085、1.827±0.114、2.160±0.164、1.767±0.146、1.493±0.163,以100 nmol/L S1P干预组的表达量最高,各干预组均显著高于对照组,差异有统计学意义(P值均<0.05)。对照组、S1P组、VPC组、VPC+S1P组细胞N-Cadherin mRNA表达量分别为1.000±0.114、2.273±0.341、0.920±0.096、0.340±0.110;对照组、S1P组、VPC+S1P组N-Cadherin蛋白表达量分别为1.000±0.176、2.167±0.242、0.510±0.151,细胞迁移率分别为(32.5±2.6)%、(57.5±3.3)%、(11.2±3.5)%,穿膜细胞数分别为(79±4.3)、(168±5.7)、(55±3.7)个/200倍视野。S1P组较对照组显著增加,VPC+S1P组较S1P组及对照组显著减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。
结论S1P干预可增强胰腺癌PANC1细胞的迁移、侵袭能力,应用S1P特异性受体拮抗剂VPC23019预处理可完全阻断S1P的作用,其机制可能与下调N-Cadherin基因表达有关。