人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体在CHO细胞中的高效表达

• 作 者: 赵庆国 黄培堂 刘士辉
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所北京100071石家庄白求恩国际和平医院优生优育中心,北京100071,北京100071
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 1995年4期
• 关键词: 组织型纤溶酶原激活剂 突变体 基因表达 增强 Tissue-type plasminogen activator Mutant Enhancer Gene ex
• 基金项目: 国家自然科学基金

构建了二氢叶酸还原酶（dhfr）选择基因启动子上游无增强子（cnhancer）的组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）组合突变体FrGGI真核表达质粒pZLFrGGI。将pZLFrGGI酶切线性化,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷型中国仓鼠卵巢细胞系（CHO-dhfr^-）。用氨甲喋呤（MTX）筛选转染细胞。混合加压后,挑选克隆,在1×10^-7mol/L MTX压力下,得到了表达水平达1500～2