鸡γ-干扰素基因在昆虫细胞／杆状病毒载体系统中的表达

• 作 者: 王海艳 刘胜旺 孔宪刚 赵振华
• 机 构: 内蒙古农业大学动物科学与医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2004年6期
• 关键词: IFN-γ 昆虫细胞 表达 Γ-干扰素 重组杆状病毒 重组蛋白 基因 位点 移载 特异引物 chicken IFN-γbaculovirusrecombinan
• 基金项目: 国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2001AA249032)资助

将鸡(Gallus gallus)的γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMeiBacB的BamHⅠ位点上，构建真核转移载体pMeiBacB-ChIFN-γ经限制性内切酶消化、Ch／FN-γ特异引物PCR鉴定和序列测定，证明目的基因正确克隆到载体的预期位点。将纯化的pMeiBacB-ChIFN-γ质粒与杆状病毒DNA(Bac-N-Blue^TMDNA)共转染sf9昆虫细胞，经3轮蓝斑筛选纯化，获得了重组杆状病毒rBaculovirus-ChIFN-γ。提取病毒DN