不同启动子调控的PNP基因载体的构建和表达差异性分析

• 作 者: 蔡晓坤 林菊生 刘址忠 薛秀兰 梁扩寰
• 机 构: 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所
• 出 处: 华中科技大学学报(医学版)
• 发表日期: 2005年1期
• 关键词: PNP 启动子 肝癌细胞 基因表达载体 调控 基因 PCDNA3 特异表达 组织特异性 重组体 PNP/Mep-dR systemCMV promoterAF0

目的分别构建巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)通用启动子和甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)组织特异性启动子调控的PNP基因表达载体并分析二者表达的差异性.方法将AF0.3启动子插入载体pcDNA3.0, 构建肝癌细胞特异表达载体pAF0.3;将PNP基因分别插入到pcDNA3.0和pAF0.3 中,构建不同启动子调控下的PNP基因表达载体pcDNA3.0/PNP和pAF0.3/PNP;通过酶切、PCR及测序鉴定各重组体.采用脂质体介导法将两种PNP基因表达载体转染不同的细胞