【摘 要】
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目的 探究鳖甲煎丸含药血清通过微小RNA 21（miR-21）调控磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFB）增殖的影响。方法 给予大鼠灌胃处理制备含药血清，将KFB细胞分为对照组、16.00%鳖甲煎丸含药血清组、miR NC组、miR-21 mimics组；实时荧光定量PCR检测正常皮肤成纤维细胞NFB及各组KFB细胞样本中miR-21表
【机 构】
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成都中医药大学医学与生命科学学院/附属生殖妇幼医院
【基金项目】
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四川省卫生和计划生育委员会项目（17PJ166）；
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目的 探究鳖甲煎丸含药血清通过微小RNA 21（miR-21）调控磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFB）增殖的影响。方法 给予大鼠灌胃处理制备含药血清，将KFB细胞分为对照组、16.00%鳖甲煎丸含药血清组、miR NC组、miR-21 mimics组；实时荧光定量PCR检测正常皮肤成纤维细胞NFB及各组KFB细胞样本中miR-21表达水平；CCK-8检测KFB细胞增殖情况；流式细胞仪检测KFB细胞周期；Western blot检测细胞增殖、细胞周期及PI3K/Akt通路相关蛋白表达情况；裸鼠皮下移植人0.5 mm3瘢痕疙瘩组织构建瘢痕疙瘩裸鼠模型；建模成功后将裸鼠随机分为对照组、鳖甲煎丸组（12 g/kg鳖甲煎丸）、miR NC组（miR NC组）、miR-21 agomir组（miR-21 agomir）,5只/组；鳖甲煎丸组裸鼠灌胃12 g/kg鳖甲煎丸，miR NC组与miR-21 agomir组裸鼠灌胃12 g/kg鳖甲煎丸后尾静脉注射50nmol/L miR NC及miR-21 agomir,对照组灌胃等量生理盐水，1次/天，连续30d;游标卡尺测量瘢痕疙瘩组织大小，并计算体积。结果 与NFB相比相比，KFB细胞中miR-21表达水平显著增加（P＜0.05）。相较于对照组，2.00%、4.00%、8.00%、16.00%鳖甲煎丸含药血清组KFB细胞增殖抑制率显著增加（P＜0.05）,具有浓度依赖性，选择16.00%鳖甲煎丸含药血清组进行后续实验（P＜0.05）。相较于对照组，16.00%鳖甲煎丸含药血清组KFB细胞中miR-21、c-Myc表达水平、S期和G2/M期细胞、CDK4、Cyclin D1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt水平显著降低，细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞显著增加（P＜0.05）;相较于16.00%鳖甲煎丸含药血清组，miR NC组miR-21、c-Myc表达水平、细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞、S期和G2/M期细胞、CDK4、Cyclin D1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt水平无显著差异（P＞0.05）,miR-21 mimics组miR-21、c-Myc表达水平、S期细胞、CDK4、Cyclin D1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt水平显著增加，细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞显著降低（P＜0.05）;相较于对照组，鳖甲煎丸组瘢痕疙瘩体积显著减小（P＜0.05）;相较于鳖甲煎丸组，miR NC组瘢痕疙瘩体积无显著差异（P＞0.05）,miR-21 agomir组瘢痕疙瘩体积显著增大（P＜0.05）。结论 鳖甲煎丸含药血清通过下调miR-21表达来抑制PI3K/Akt通路活化，从而抑制KFB细胞增殖。
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