【摘 要】
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目的研究钙调神经磷酸酶(CaN)信号途径与蛋白激酶C(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶A(PKA)的相互调节在哮喘气道重塑发病中的作用。方法建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠
【机 构】
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北京大学第三医院呼吸科,北京大学第一医院心血管研究所
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目的研究钙调神经磷酸酶(CaN)信号途径与蛋白激酶C(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶A(PKA)的相互调节在哮喘气道重塑发病中的作用。方法建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠模型,实验分为哮喘组、CaN抑制剂环孢霉素A(CsA)组和对照组,采用磷酸化和去磷酸化方法测定肺组织CaN活性、MAPK活性、PKC活性、PKA活性。在离体培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中,以尾加压素Ⅱ(UⅡ)为刺激因素,测定CaN,PKC和MAPK活性以及它们之间的相互调节。结果(1)哮喘组CaN活性、MAPK活性和PKC活性分别较对照组高19%(P<0.01)、28%(P<0.01)和35%(P<0.05),PKA活性较对照组低53%(P<0.01)。CsA组CaN活性、MAPK活性和PKC活性分别较哮喘组低52%(P<0.01)、18%(P<0.05)和52%(P<0.01),PKA活性较哮喘组高2.65倍(P<0.01)。(2)UⅡ10-7mol/L孵育20min引起ASMC PKC和MAPK活性分别较对照组增加44%和24%(P<0.01),并呈时间依赖性引起ASMC中CaN活性增加,24h为对照组的1.67倍(P<0.01)。(3)与单用UⅡ10-7mol/L组比,CaN抑制剂CsA10-6mol/L使CaN活性降低了45%(P<0.01),MAPK抑制剂PD9805950μmol/L对CaN活性无明显影响(P>0.05),PKC抑制剂H750μmol/L使CaN活性下降21%(P<0.05)。(4)CsA10-6mol/L作用使UⅡ10-7mol/L刺激的ASMC PKC活性下降了14%(P<0.05),对MAPK活性无明显影响(P>0.05)。结论在哮喘气道重塑的发生过程中,CaN与MAPK、PKC和PKA之间存在相互调节。
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