小鼠IL-33基因cDNA克隆与真核质粒的构建与表达

• 作 者: 张林 程晓刚 练栩辉 李鑫 刘林娜 赵柏程 任飞 李晗郡 刘
• 机 构: 成都医学院生物医学系,成都医学院免疫学教研室
• 出 处: 徐州医学院学报
• 发表日期: 2010年7期
• 关键词: IL-33 基因克隆 真核表达 IL-33 gene cloning eukaryotic expression
• 基金项目: 成都医学院实验室开放基金（2009X013）

目的克隆小鼠IL-33基因（mIL-33）cDNA构建其真核表达质粒,并转染EL-4细胞检测其表达。方法提取小鼠脑与肺组织总RNA,经逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增小鼠IL-33基因cDNA,酶切后插入pcDNA-3.1构建其真核表达载体pcDNA-mIL-33,重组质粒转染EL-4细胞,RT-PCR与ELISA法检测目的基因表达。结果 pcDNA-mIL-33中插入的DNA序列测定结果与mIL-33 cDNA序列一致,重组质粒转染EL-4细胞后检测到相应基因表达。结论成功克隆小鼠IL-33基因