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目的 探索人fg12凝血酶原酶（hfg12）短干扰RNA（siRNA）在体外对hfg12凝血酶原酶基因表达的干预效应。方法构建产生hfg12短发夹状RNA（shRNA）的载体Phfg12shRNA，将其与hfg12-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合基因表达质粒pEGFPhfg12共转染到中国仓鼠卵母细胞（CHO细胞），转染48h后，倒置荧光显微镜下观察EGFP在CHO细胞中的表达，并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。将Phfg12shRNA和hfg12表达质粒pcDNA3．1-hfg12共转染到CHO细胞，通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测hfg12基因转录和蛋白表达水平的变化。分为4组：共转染P—hfg12shRNA和pcDNA3．1-hfg12为干预组，共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3．1-hfg12为非相关干预组，仅转染pcDNA3．1-hfg12为未干预组，不转染任何质粒为空白组。结果在CHO细胞中，含Phfg12shRNA的干预组较未干预组和非相关干预组的绿色荧光强度明显减弱，荧光细胞数明显减少；荧光表达阳性细胞率：干预组α为6．5％±0．2％，未干预组α为40．1％±1．8％，两组比较，Χ^2=8．056，P〈0．01，差异有统计学意义。抑制效率达85．5％。hfg12shRNA显著抑制了hfg12mRNA和蛋白质的表达，干预组hfg12mRNA水平为0．11±0．01，未干预组为0．84±0．06，两组比较，F=10．7，P〈0．01，差异有统计学意义。结论P—hfg12shRNA可在体外高效特异地抑制hfg12基因转录和蛋白的表达，为进一步的体内干扰实验奠定了基础。