胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养的滋养细胞黏附作用的影响及机理探讨

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目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)影响体外培养的滋养细胞黏附作用的机理.方法从6例早孕患者人工流产的绒毛组织中获取滋养细胞,建立体外滋养细胞黏附模型,在无血清培养液中,加入浓度为10 nmol/L的IGF-Ⅰ进行培养处理.单纯加入IGF-Ⅰ的细胞为IGF-Ⅰ组;加入IGF-Ⅰ及抗整合素αvβ3 抗体(抗整合素抗体)的细胞为IGF-Ⅰ+抗整合素组;不加IGF-Ⅰ的细胞为对照组.采用酶联免疫检测仪测定吸光度(A)值,表示黏附细胞的相对数量.于扫描电镜下观察IGF-Ⅰ组和对照组的细胞形态的变化,并采用免疫组化方法,检测该两组细胞中磷酸化黏着斑激酶的表达.结果 IGF-Ⅰ组的平均A值为0.491±0.049,明显高于对照组的0.198±0.022,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).IGF-Ⅰ+抗整合素组的平均A值为0.184±0.031,明显低于IGF-Ⅰ组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜观察显示,滋养细胞加入IGF-Ⅰ后,与纤维粘连蛋白黏附局部,可见滋养细胞表面片状伪足形成,与对照组比较,片状伪足明显增多并伸展.免疫组化染色结果,滋养细胞加入IGF-Ⅰ后,细胞膜及细胞质中磷酸化黏着斑激酶呈阳性表达.结论浓度为10 nmol/L的IGF-Ⅰ通过激活磷酸化黏着斑激酶,刺激滋养细胞表面片状伪足的形成并伸展,促进滋养细胞黏附到纤维粘连蛋白上,而抗整合素抗体则可明显抑制IGF-Ⅰ的促黏附作用。

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