【摘 要】
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目的:检测Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况,并观察内毒素(lipopolysaccharides,LPS)对人牙周膜成纤维细胞Del-1表达的影响,探讨其在牙周炎进展中的可能作用机制.
【机 构】
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南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室,南京医科大学附属口腔医院牙周科,江苏南京210029
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目的:检测Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况,并观察内毒素(lipopolysaccharides,LPS)对人牙周膜成纤维细胞Del-1表达的影响,探讨其在牙周炎进展中的可能作用机制.方法:组织块法取人牙周膜成纤维细胞,用细胞免疫荧光、流式细胞术及体外管腔形成试验鉴别细胞来源,细胞免疫荧光检测Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况;用不同浓度LPS刺激细胞,检测Del-1蛋白的表达水平,以Del-1减少最显著的LPS浓度为最佳刺激浓度,再用该浓度的LPS刺激细胞不同时间,检测Del-1及炎症因子IL-6的表达水平;用不同浓度的Del-1蛋白预刺激细胞1h,再用最佳浓度的LPS刺激细胞24 h,检测炎症因子IL-6的表达情况;用最适宜浓度的Del-1蛋白预刺激细胞1h,再用LPS刺激细胞10 min,检测IκBα的激活情况.结果:Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中有表达,定位于细胞的胞浆中;LPS刺激细胞时Del-1的表达水平降低,并随浓度的升高和处理时间的延长而下降,IL-6的表达与之相反;Del-1蛋白可下调LPS诱导的炎症因子IL-6的表达,抑制IκBα的磷酸化.结论:本研究首次发现Del-1可以在人牙周膜成纤维细胞中表达,且在LPS刺激人牙周膜成纤维细胞时表达量降低,Del-1蛋白可通过抑制NF-κB通路的激活,在牙周炎的发生发展中发挥拮抗作用.
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