人KiSS-1基因克隆及其慢病毒载体的构建

• 作 者: 于波 张俐
• 机 构: 福建中医学院骨伤系
• 出 处: 中国组织工程研究与临床康复
• 发表日期: 2008年42期
• 关键词: 基因 克隆 分子 病毒载体
• 基金项目: KiSS-1和p27kip1基因转染治疗骨肉瘤的基础与临床研究”：卫生部卫生教育联合攻关项目（WKJ2005.2-014）,福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划（闽教科（2006）35号）.

背景：慢性病毒载体技术是目前转基因中最有效和最成功的方法，技术操作简便。目的：克隆转移抑制基因KiSS-1基因不含信号肽的表达序列，构建人KiSS-1基因的慢病毒表达载体。设计、时间及地点：开放性实验于200609／2007-12在福建师范大学发育学院实验室完成。材料：载体pNL-IRES2-EGFP由福建师范大学发育学院实验室保存。方法：从人正常胎盘组织中提取总RNA，经反转录-聚合酶链反应得到KiSS-1基因开放阅读框cDNA序列，行将其克隆到慢病毒载体pNL-IRES2-EGFP中，构建其表达质粒p