【摘 要】
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目的 探讨地塞米松对顺铂致斑马鱼侧线神经丘毛细胞损伤的保护作用.方法 ① 将受精后5天(5 dpf)斑马鱼幼鱼分为对照组、顺铂组、顺铂+地塞米松组,每组10条.对照组置于系统水中;顺铂组斑马鱼幼鱼中加入50μmol/L顺铂孵育24小时;顺铂+地塞米松组预先给予25μmol/L地塞米松作用24小时,再给予50μmol/L顺铂孵育24小时;分别在移除顺铂后6、12、24、48 h时采用FM1-43FX染色标记斑马鱼侧线毛细胞,在荧光显微镜下检测三组毛细胞数.②利用顺铂、地塞米松建立斑马鱼氧化应激模型,在移除顺
【机 构】
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南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科 广州 510280
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目的 探讨地塞米松对顺铂致斑马鱼侧线神经丘毛细胞损伤的保护作用.方法 ① 将受精后5天(5 dpf)斑马鱼幼鱼分为对照组、顺铂组、顺铂+地塞米松组,每组10条.对照组置于系统水中;顺铂组斑马鱼幼鱼中加入50μmol/L顺铂孵育24小时;顺铂+地塞米松组预先给予25μmol/L地塞米松作用24小时,再给予50μmol/L顺铂孵育24小时;分别在移除顺铂后6、12、24、48 h时采用FM1-43FX染色标记斑马鱼侧线毛细胞,在荧光显微镜下检测三组毛细胞数.②利用顺铂、地塞米松建立斑马鱼氧化应激模型,在移除顺铂6 h后利用DCFH-DA、DPPP荧光分子探针测定三组斑马鱼幼鱼体内的活性氧(ROS)、脂质过氧化程度(MDA).③采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测三组抗氧化物酶基因sod1、cat1和gstr的表达水平.结果 在移除顺铂后6、12、24 h,与对照组(圴为12.09±1.32个)相比,顺铂组(分别为2.38±0.65、4.45±0.61、6.37±1.08个)、顺铂+地塞米松组(分别为5.25±1.02、5.66±0.71、8.56±1.26个)侧线神经丘毛细胞数目明显降低(圴为P<0.05),地塞米松组与顺铂组相比差异均有统计学意义(均为P0.05).顺铂组斑马鱼体内ROS、MDA含量较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),同时,顺铂+地塞米松组斑马鱼体内ROS含量显著低于顺铂组(P<0.05).顺铂组、顺铂+地塞米松组斑马鱼体内的cat1基因表达水平较对照组显著性下降(P0.05).结论 地塞米松可以减弱顺铂导致的斑马鱼毛细胞耳毒性损伤,同时保护斑马鱼毛细胞免受氧化应激的影响.
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