黄萎病菌诱导海岛棉酵母双杂交cDNA文库构建及评价

• 作 者: 杨君 张艳 王伟巧 荣伟 王省芬 马峙英
• 机 构: 河北农业大学农学院教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室河北省作物种质资源重点实验室,河北农业大学作物学博士后科研流动站
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2014年12期
• 关键词: 黄萎病菌 海岛棉 酵母双杂交 CDNA文库 Verticillium dahliae Gossypium barbadense Yeast two-hybr

采用SMARTTMcDNA合成技术,通过同源重组方法构建了海岛棉Pima90-53经强致病力黄萎病菌诱导的酵母双杂交cDNA文库。经测定,文库容量为2.82×10^6,滴度为5.02×10^8cfu/mL。菌落PCR显示,重组到pGADT7-Rec载体上的cDNA片段大小集中在500-1 500 bp之间,重组率93.33%。该文库完全可用于下一步互作蛋白筛选、信号转导组件确定及抗病蛋白结构和功能分析。