脱氧尿嘧啶及尿嘧啶DNA糖基化酶抗PCR产物污染能力研究

• 作 者: 郑子君
• 机 构: 简阳市人民医院检验科
• 出 处: 职业卫生与病伤
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDC) 脱氧尿嘧啶(dUTP) 荧光定量PCR UDG dUTP Fluorometric quantitative PCR

目的探讨脱氧尿嘧啶及尿嘧啶DNA糖基化酶抗PCR产物污染的能力。方法用Taq-Man荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBVvDNA PCR扩增产物作为污染源，分别加至含dUTP／UDC的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中，在荧光定量PCR仪上进行定量检测，从而得出含dUTP／UDC的PCR反应体系的抗污染能力。结果最佳抗污染实验条件：UDG酶含量0．05U，消化时间37℃ 5min，灭活时间92℃ 1min；dUTP100％代替dTTP。含0．05U的UDG抗污