【摘 要】
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为了阐释续断“发汗”加工导致三萜皂苷类成分含量变化的机制,该研究对续断“发汗”加工前后总三萜皂苷以及指标性成分川续断皂苷Ⅵ的含量进行了检测,同时运用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantifi-cation,iTRAQ)技术结合LC-MS/MS对续断“发汗”加工前后的差异表达蛋白进行了分析.结果 显示,“发汗”加工后,续断总三萜皂苷的含量显著下降,川续断皂苷Ⅵ的含量显著升高;经iTRAQ-LC-MS/MS方法分析得到140个显著
【机 构】
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贵州中医药大学,贵州贵阳550025;中国中医科学院中药资源中心,北京100700
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为了阐释续断“发汗”加工导致三萜皂苷类成分含量变化的机制,该研究对续断“发汗”加工前后总三萜皂苷以及指标性成分川续断皂苷Ⅵ的含量进行了检测,同时运用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantifi-cation,iTRAQ)技术结合LC-MS/MS对续断“发汗”加工前后的差异表达蛋白进行了分析.结果 显示,“发汗”加工后,续断总三萜皂苷的含量显著下降,川续断皂苷Ⅵ的含量显著升高;经iTRAQ-LC-MS/MS方法分析得到140个显著差异表达蛋白,“发汗”加工后显著上调蛋白为50个,显著下调蛋白为90个.GO分析发现差异蛋白中存在多种水解酶、氧化还原酶及转移酶,进一步检测2类差异表达的氧化还原酶的活性,结果与iTRAQ-LC-MS/MS分析一致.通过分析差异蛋白中与三萜皂苷生物合成途径相关的酶,发现参与三萜皂苷结构修饰的CYP450及UGT家族各有1个成员在“发汗”加工后表达显著下调,表明“发汗”加工可能通过影响续断三萜皂苷生物合成途径下游修饰酶CYP450及UGT的表达进而导致三萜皂苷类化学成分含量的变化.
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