鸡蛋清溶菌酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究

• 作 者: 权志中 张丞斌 余荣 刘长江
• 机 构: 沈阳农业大学食品学院博士,浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州康德权科技有限公司
• 出 处: 饲料工业
• 发表日期: 2007年24期
• 关键词: 溶菌酶 克隆 表达 毕赤酵母

研究从鸡输卵管组织提取细胞总RNA,根据Gene Bank中已发表的鸡溶菌酶基因序列,设计合成特异引物,合成cDNA序列,并以此为模版,PCR扩增鸡溶菌酶基因。用Xho I和Xba I对LYZ基因的PCR产物和真核表达载体pPIC6αA进行双酶切后转化到大肠杆菌（DH5α）中,构建成为真核重组表达载体pPIC6αA-LYZ。该载体经PstXI酶切线性化后,以电击转化方法导入到毕赤酵母宿主菌X-33中,经Blasticidin抗性筛选,得到鸡溶菌酶基因重组毕赤酵母菌株;甲醇96h（发酵罐诱导100h）诱导表