【摘 要】
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该研究旨在探讨木犀草素调控脂氧合酶途径抗H9c2心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/reper-fusion,OGD/R)损伤的具体分子机制.首先利用Discovery Studio 2019软件对脂氧合酶途径3个关键酶脂氧合酶5(lipoxyge-nase 5,ALOX5)、脂氧合酶12(lipoxygenase 12,ALOX12)、脂氧合酶15(lipoxygenase 15,ALOX15)与木犀草素进行分子对接,结果显示木犀草素与三者均有较高的对接分数
【机 构】
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北京中医药大学中药学院,北京100029;北京中医药大学中药学院,北京100029;北京中医药大学东方医院,北京100029;北京中医药大学中医学院,北京100029;北京中医药大学生命科学学院,北京
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该研究旨在探讨木犀草素调控脂氧合酶途径抗H9c2心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/reper-fusion,OGD/R)损伤的具体分子机制.首先利用Discovery Studio 2019软件对脂氧合酶途径3个关键酶脂氧合酶5(lipoxyge-nase 5,ALOX5)、脂氧合酶12(lipoxygenase 12,ALOX12)、脂氧合酶15(lipoxygenase 15,ALOX15)与木犀草素进行分子对接,结果显示木犀草素与三者均有较高的对接分数和与原配体相似的作用基团,据此推测木犀草素可能具有与原配体相类似的生物活性,对脂氧合酶途径有潜在的抑制作用.基于此,体外培养H9c2心肌细胞,采用缺氧缺糖8h复氧复糖12 h诱导H9c2心肌细胞损伤模型,荧光倒置显微镜下观察H9c2心肌细胞形态,四甲基偶氮唑盐(tetrazolium,MTT)比色法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)比色法检测细胞上清LDH水平,结果显示与模型组相比,木犀草素可以明显保护H9c2细胞形态,显著提高OGD/R损伤模型H9e2心肌细胞存活率,显著降低细胞上清LDH水平,抑制细胞毒性,保护细胞膜的完整性.酶联免疫吸附试验检测上清中炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,与模型组相比,木犀草素可显著降低炎症因子IL-6、TNF-α水平.蛋白免疫印迹法检测脂氧合酶途径关键酶ALOX5、ALOX12、ALOX15的蛋白表达水平,木犀草素干预后ALOX5、ALOX12、ALOX15的蛋白表达水平较模型组均显著降低.上述研究结果表明木犀草素可以通过抑制脂氧合酶途径的激活,抑制炎症因子IL-6、TNF-α释放,从而在OGD/R诱导的心肌细胞损伤模型中发挥保护作用.
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