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目的探讨人乳腺癌雌激素受体（ER）基因启动子的去甲基化和ER蛋白表达功能恢复的关系。方法用甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸氢盐基因组测序方法检测乳腺癌细胞ER基因启动子的甲基化状态；用RT-PCR方法从mRNA水平检测ER和孕激素受体（PR）基因的表达；用Western blot方法从蛋白水平探测ER基因的表达；MTT方法检测重新表达ER蛋白的功能。结果在ER阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中，ER基因启动子甲基化的水平较高，而ERmRNA和ER蛋白均不表达。MDA-MB-231细胞用去甲基化剂5-杂氮-2’-脱氧胞嘧啶（5-AZA-2＇-deoxyC）处理，可以恢复该细胞系ERmRNA和ER蛋白的表达，同时伴有ER基因启动子甲基化水平的降低以及PR基因的表达。MDA-MB-231细胞经去甲基化逆转ER表达后，应用三苯氧胺治疗，乳腺癌细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05）。结论人乳腺癌ER基因的失活与其基因启动子高甲基化关系密切。去甲基化剂5-AZA-2＇-deoxyC能较好地降低MDA-MB-231细胞DNA甲基化，并有效激活功能性ER基因的再表达，为ER基因阴性的乳腺癌患者接受内分泌治疗提供了新的途径和理论基础。