探讨长波紫外线（UVA）诱导人皮肤成纤维细胞（HSF）光老化中miR-146a的表达情况，以及上调miR-146a表达对其靶基因Smad4及细胞光老化的影响。
方法以10 J/cm2 UVA照射HSF（UVA照射组），分别在0、3、7、14 d提取RNA，实时定量PCR检测miR-146a的表达量。通过慢病毒转染上调miR-146a的表达（miR-146a过表达组），在7 d、14 d后用荧光显微镜观察转染效率，并通过实时定量PCR验证细胞内miR-146a表达量。空白对照组为正常培养的HSF（不做任何处理），miR-146a过表达组为慢病毒转染HSF后，再用UVA照射。MTT法检测空白对照组、UVA照射组、miR-146a过表达组、miR-146a过表达组细胞增殖吸光度（A值），实时定量PCR检测各组细胞内老化相关基因p53、p16和p21 mRNA的表达，Western印迹法检测各组细胞内Smad4蛋白表达。采用重复测量的方差分析、析因设计的方差分析进行统计学分析。
结果重复测量的方差分析显示，随培养时间的延长，UVA照射组和空白对照组miR-146a的表达量均逐渐下降（F=213.840，P<0.01）；UVA照射组表达量低于空白对照组（F=52.55，P<0.01），且照射时间越长，下调越明显。慢病毒转染HSF后，细胞内均有较高的荧光表达，miR-146a过表达组在第7天（10.31 ± 0.17）与第14天时（9.65 ± 0.19）的miR-146a表达量差异无统计学意义（P>0.05），但较空白对照组（分别为8.33 ± 0.13和7.86 ± 0.11）显著增高，组间差异有统计学意义（F=42.49，P<0.01）。析因设计的方差分析显示，UVA照射对细胞增殖活性有抑制作用（P<0.01），UVA照射组、UVA+ miR-146a组细胞增殖均分别低于空白对照组、miR-146a过表达组（P<0.01）；慢病毒转染上调miR-146a的表达对细胞增殖活性也有影响（P<0.01），但miR-146a过表达组与空白对照组差异无统计学意义（P>0.05），UVA+ miR-146a组显著高于UVA照射组（P<0.01）。实时定量PCR和Western印迹法结果显示，UVA照射可上调p21、p53、p16 mRNA的表达（均P<0.01），同时对细胞内Smad4蛋白表达有促进作用（P<0.01）；UVA照射组、UVA+ miR-146a组p21、p53、p16 mRNA和Smad4蛋白表达均分别高于空白对照组、miR-146a过表达组（均P<0.01），而miR-146a过表达组与空白对照组相比差异均无统计学意义（均P>0.05），UVA+ miR-146a组均显著低于UVA照射组（均P<0.01）。
结论在UVA诱导光老化的HSF中，miR-146a的表达受到抑制，上调其表达能够抑制Smad4的表达，促进光老化细胞增殖，起到抗细胞光老化的作用。