家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定

• 作 者: 杨杰 张海涛 翟频 白文霞 潘孝青 邵乐
• 机 构: 江苏省农业科学院畜牧研究所,南京天邦生物科技有限公司,南京工业大学江苏省药物安全性评价中心
• 出 处: 江苏农业科学
• 发表日期: 2011年6期
• 关键词: 早孕因子 家兔 原核表达 蛋白纯化
• 基金项目: 江苏省农业科学院基金（编号：6110818）,江苏省高技术（农业）研究计划（编号：BG2007325）,江苏省农业三项工程[编号：SX（2010）26].

通过已构建的含家兔早孕蛋白因子（EPF）基因的重组表达质粒，转化大肠杆菌Rosseta（DE3），在IPTG诱导下表达硫氧还原蛋白-家兔早孕因子融合蛋白（Trx—EPF）。结果显示蛋白表达量占菌体总蛋白的30％左右。重组家兔早孕因子融合蛋白（Trx—EPF）经过Ni2＋柱纯化、柱上复性，浓缩以后溶液中蛋白浓度达到10mg／mL，复性率达到13．1％。SDS—PAGE及WesternBlot分析表明，在分子量30ku左右处有一特异性蛋白条带。