豌豆白化苗蛋白质双向电泳技术的建立

• 作 者: 赵鑫 刘红霞 陈佰鸿 毕阳
• 机 构: 中国农业科学院作物科学研究所农业部作物遗传育种重点开放实验室国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,甘肃农业大学农学院
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2010年10期
• 关键词: 蛋白质组学 豌豆 2-DE Proteomic Pea 2-DE
• 基金项目: 国家自然科学基金（30500342）,中国博士后基金（2004036176）

以豌豆白化苗为试验材料，分析了不同的蛋白质提取时间（4h、8h及过夜）和蛋白质上样量（500、1000、2000μg）对双向电泳蛋白质得率和等电聚焦效果的影响。结果表明，不同的蛋白提取时间和蛋白上样量对等电聚焦效果影响较大。适宜的豌豆白化苗提取时间应至少长于8h，最好提取过夜，能裂解得到大量蛋白质；适宜的豌豆白化苗蛋白上样量为1000μg，此条件下，双向电泳的分辨率最高，分离出的蛋白大多为小分子量功能性蛋白。