【摘 要】
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目的采用抗体芯片技术检测乳腺癌患者血清中纤溶酶原激活物抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor,PAI-1)的表达。方法制备鼠抗人PAI-1单抗腹水及多抗,经ProteinA-Seph
【机 构】
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航天中心医院检验科,北京大学肿瘤医院,北京市肿瘤防治研究所检验科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,
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目的采用抗体芯片技术检测乳腺癌患者血清中纤溶酶原激活物抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor,PAI-1)的表达。方法制备鼠抗人PAI-1单抗腹水及多抗,经ProteinA-Sepharose-4B柱纯化后,点至醛基玻片上(点样浓度均分别为1和0.1 mg/ml),制备抗体芯片,加入待测血清(分别进行1∶2、1∶10、1∶100稀释),利用晶芯Luxscan10K-A芯片扫描仪扫描,芯片图象分析软件晶芯SpotData Pro分析后,获得最适点样浓度和血清稀释倍数。采用优化后的抗体芯片法检测202份乳腺癌患者和204份健康体检者血清样本中PAI-1的表达。结果确定点样单抗最适浓度为1 mg/ml,血清最适稀释倍数为1∶100。PAI-1在204份健康体检者血清样本中阳性率为4.4%(9/204),在202份乳腺癌患者血清中的总体阳性率为25.2%,特异性为96%;其中119份发生转移和83份未发生转移的乳腺癌患者血清中PAI-1阳性率分别为35.3%(42/119)和10.8%(9/83),阳性率随肿瘤的分期进展而升高。结论 PAI-1在乳腺癌患者血清中的表达明显高于健康体检者,且随着肿瘤的分期进展阳性率升高,其有望成为新的乳腺癌血清筛查指标。
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