【摘 要】
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将禽流感病毒H5N1亚型具有免疫原性的血凝素（HA）基因和神经氨酸酶（NA）基因，克隆于表达质粒Tmd-CMV-IRES-EGFP中，使其位于含细胞巨化病毒（CMV）早期启动子的调控下，并与增强型绿色荧光蛋
【机 构】
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河北农业大学,青岛易邦生物工程有限公司
【基金项目】
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863项目(家禽重要病毒病基因工程疫苗研究和创新。课题编号:2006AA10A205)
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将禽流感病毒H5N1亚型具有免疫原性的血凝素（HA）基因和神经氨酸酶（NA）基因，克隆于表达质粒Tmd-CMV-IRES-EGFP中，使其位于含细胞巨化病毒（CMV）早期启动子的调控下，并与增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）串联，将上述串联基因插入到火鸡疱疹病毒（HVT）基因的非必需区（US10）中，从而构建了带标记的重组转移质粒。将该转移载体质粒感染HVT的鸡胚成纤维细胞（CEF），利用脂质体共同转染CEF，待病毒蚀斑出现后，利用蚀斑筛选带有绿色荧光的重组病毒蚀斑，数轮蚀斑纯化，经荧光和PCR初步鉴定获
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