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本研究用改良碱煮法提取玉米叶片基因组DNA,探索了DNA模板量、引物量、PCR保护剂对PCR反应的影响。结果表明,当DNA模板原液稀释5倍,质量浓度为27.3 ng·μL^-1,且反应体系中加入保护剂PVP-40和BSA时可有效提高PCR效率,结合双重PCR的方法实现了快速高效的交换单株筛选。