探讨钙结合蛋白S100A4在食管鳞癌上皮间质转化(EMT)过程中的作用及其可能的分子机制。
方法化学合成靶向S100A4的3对siRNA序列瞬时转染EC9706细胞，同时以转染阴性对照siRNA、脂质体和空白EC9706细胞作为对照，荧光定量RT–PCR和Western blot法检测其抑制效率。将抑制效果最佳的S100A4 siRNA2以相同条件转染食管癌EC9706细胞，同时以转染阴性对照siRNA、脂质体和空白EC9706细胞作为对照；然后在转染S100A4 siRNA2的EC9706细胞中转染snail真核表达载体，并以S100A4 siRNA2组、snail真核表达载体组和空白组为对照，分别采用荧光定量RT–PCR和Western blot法检测E–cadherin、vimentin和snail的表达，倒置显微镜观察各组EC9706细胞形态变化，Boyden chamber和划痕实验检测各组EC9706细胞侵袭迁移能力的变化，CCK–8法检测各组EC9706细胞增殖能力的变化。
结果S100A4 siRNA2组S100A4 mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.417±0.041和0.337±0.039，穿膜细胞数为(61.608±8.937)个，划痕愈合距离为(0.216±0.064)mm，A值为0.623±0.084，E–cadherin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.619±0.032和0.495±0.034，vimentin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.514±0.032和0.427±0.028，snail mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.573±0.029和0.429±0.041，与脂质体组、阴性对照组和空白组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。S100A4 siRNA2作用于EC9706细胞24 h后，细胞形态向上皮细胞形态转变，呈去梭形化趋势。S100A4 siRNA2＋snail真核表达载体组的穿膜细胞数和划痕愈合距离分别为(69.382±9.666)个和(0.274±0.029)mm，A值为0.823±0.101，snail mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.704±0.037和0.625±0.031，vimentin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.712±0.046和0.609±0.038，高于S100A4 siRNA2组(均P<0.05)；S100A4 siRNA2＋snail真核表达载体组中E–cadherin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.437±0.038和0.381±0.031，低于S100A4 siRNA2组(均P<0.05)。但snail表达增高对EC9706细胞形态无影响。
结论S100A4可通过调控snail的表达参与食管癌EMT过程，进而在食管癌浸润转移中发挥作用。