观察klotho蛋白对硫酸吲哚酚（IS）诱导人脐静脉内皮细胞损伤的作用，并探讨内质网应激是否参与此过程中及可能机制。
方法（1）体外培养人脐静脉内皮细胞，分别以5、25、50 mg/L IS干预细胞48 h，以50 mg/L IS干预细胞12、24、48 h，CCK-8法测定细胞活性，观察IS对细胞活性的影响。（2）50 mg/L IS处理细胞48 h，同时给予0、1、10、100 μg/L klotho蛋白干预，CCK-8测定细胞活性，观察不同浓度klotho蛋白对IS毒性的影响。（3）细胞分为对照组、IS组（50 mg/L IS）、klotho组（50 mg/L IS+100 μg/L klotho）和磷酸腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）通路抑制剂Compound C组（50 mg/L IS+100 μg/L klotho+10 μmol/L Compound C）干预48 h，CCK-8测定细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡，实时荧光定量PCR、Western印迹分别检测糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的mRNA和蛋白表达，Western印迹检测磷酸化AMPK表达。
结果IS以时间依赖性和浓度依赖性的方式抑制细胞活性。50 mg/L IS组细胞活性低于对照组（P<0.05）。klotho蛋白可部分恢复IS抑制的细胞活性且呈浓度依赖。100 μg/L klotho组细胞活性高于IS组（P<0.05）。与对照组比较，IS组GRP78、CHOP表达上调，细胞凋亡率增加，磷酸化AMPK降低（均P<0.05）；与IS组比较，klotho组GRP78、CHOP表达降低，细胞凋亡率降低，磷酸化AMPK上调（均P<0.05）。klotho蛋白的作用可被Compound C阻断，上述指标Compound C组与klotho组差异均有统计学意义。
结论IS对人脐静脉内皮细胞具有毒性作用，可抑制细胞活性，诱导内质网应激及细胞凋亡；klotho蛋白可部分拮抗IS对内皮细胞的毒性作用，其机制可能与活化AMPK通路和降低内质网应激相关的细胞凋亡有关。