嗜热脂肪芽孢杆菌( Geobacillus stearothermophilus )来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB转糖苷催化活性改造

• 作 者: 董艺凝 陈卫 陈海琴 赵建新 陈永泉 张灏
• 机 构: 滁州学院生物与食品工程学院,江南大学食品学院
• 出 处: 食品与发酵工业
• 发表日期: 2020年2期
• 关键词: Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 转糖苷活性 嗜热脂肪芽孢杆菌 定点突变 化学修饰 β-galactosidasesgalactooligosaccharides(G
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31301523,31171636),安徽省自然科学基金面上项目(1708085MC72),“十二五”国家“863”计划(2011AA100905),校级科技创新团队支持计划(00001702),滁州市第六批“221”产业创新团队项目(特色农产品开发与利用)

该研究以GH42家族嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB为研究对象,针对其转糖苷活性弱的问题,采用定点突变与化学修饰相结合的方法,对其预测亲核催化位点Glu303进行了功能研究与分子改造。所得突变体Ox-E303C与野生型酶相比,可将低聚半乳糖合成量由0%提高到11.5%。研究结果表明对耐热β-半乳糖苷酶BgaB亲核催化位点进行半胱氨酸亚磺酸(—SOO-)替换,能够提高其转糖苷催化活性。该研究对GH42家族β-半乳糖苷酶转糖苷催化功