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【目的】探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。【方法】宫颈癌SiHa细胞分正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组。利用siPORT NeoFX TransfectionAgent,阴性对照组细胞转染Cy3dye labeled PremiR Negative Control,miR-99b调控组细胞转染Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor。实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测靶基因细胞分裂周期25A(CDC25A)蛋白表达。【结果】实时定量PCR结果显示,miR-99b调控组细胞,miR-99b表达增加107.23倍。正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组细胞增殖率分别为(3.26±0.44)%、(3.65±0.47)%和(2.24±0.45)%,细胞凋亡率分别为(8.12±1.54)%、(8.75±1.67)%和(14.26±1.70)%,细胞CDC25A蛋白表达分别为0.50±0.06、0.59±0.05和0.31±0.05。与正常对照组和阴性对照组比较,miR-99b调控组细胞增殖率、凋亡率和CDC25A蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】上调miR-99b表达可通过降低靶基因CDC25A表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-99b可能成为宫颈癌治疗的靶基因。