棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨

• 作 者: 周仲华 陈金湘
• 机 构: 湖南农业大学棉花研究所
• 出 处: 中国棉花
• 发表日期: 2004年9期
• 关键词: 棉花 基因组DNA RAPD PCR 随机扩增多态性DNA

针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点,主要通过快速研磨、加入PVP、挑DNA、不加RNA酶等方法,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组DNA提取的方法.另外,本文还探讨了模板浓度、Mg2+、dNTPs、Taq酶等因素对PCR的影响,得到棉花RAPD分析最佳PCR反应组成为:60 ng模板DNA、1.2 mmol·L-1 Mg2+、0.2 mmol·L-1 dNTPs、1单位Taq酶,反应体积为20μl.