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目的通过对传统TRIzol提取组织中RNA的方法进行优化,建立一种较为简便、高效、经济的提取方法,并用优化后的方法检测非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的m RNA表达水平。方法非小细胞肺癌的组织标本(包括肿瘤组织和正常组织)36例,采用传统和优化后的方法提取肺癌组织及正常组织中RNA,以SYBR Green荧光实时定量PCR分析各组织中ERCC1、RRM1、BRCA1以及管家基因GAPDH的m RNA表达水平。结果传统方法的RNA浓度和纯度分别为(0.76±0.07)mg·m L?1和1.87±0.04,优化方法的RNA浓度和纯度分别为(1.12±0.07)mg·m L?1和1.95±0.03;琼脂糖凝胶电泳表明RNA没有降解,各个引物的熔解曲线均呈单峰,特异性良好。实时荧光定量显示,肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的相对m RNA表达高于正常组织;ERCC1和BRCA1在不同病理类型(腺癌、鳞癌)的肿瘤组织中表达无显著性差异,RRM1在肺鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05);不同性别中的基因表达均无显著性差异。结论相比传统方法,利用优化后的方法提取样本的总RNA浓度、纯度和完整性均显著提高,能满足各种基因表达和定量检测实验的需要。非小细胞肺癌中ERCC1、RRM1和BRCA1的表达水平与肿瘤增殖活性密切相关,与临床肿瘤的病理类型也有一定的相关性。