论文部分内容阅读
目的:确定针对IL—1α的siRNA在细胞内与其具有同源互补序列的靶标位点结合后,特异性降解IL—1α的mRNA,从而抑制其表达的效果。方法:体外PCR扩增合成针对IL-1α靶位点的DNA表达盒,纯化后转染经LPS激活的小鼠脾淋巴细胞,在细胞内源性RNA聚合酶Ⅲ作用下转录形成siRNA,诱发目标mRNA的降解。于转染后48h收集细胞培养上清。用ELISA法测定IL—1α浓度。结果:干扰组IL—1α分泌量明显低于对照组和无关干扰组(P〈0.05),抑制率约为15%。结论:RNA干扰技术可以在原代培养的小鼠脾