【摘 要】
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为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京农业大学动物医学院
【基金项目】
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江苏省农业科技自主创新资金项目;
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为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6％～99.2％和97.9％～99.4％之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2％～93.6％和96.4％～97.5％之间；在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株.N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62ku,主要以包涵体的形式存在；用westem blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应；以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性.
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