致中国幽门螺杆菌致病岛缺失突变载体的构建及鉴定

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hudaxia110

【摘要】

：

为构建中国幽门螺杆菌(Hp)致病岛缺失突变的载体,采用PCR扩增、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切、目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化等多种基因工程技术,

【作者】

：

刘炯许国铭李兆申屠振兴聂时南

【机构】

：

第二军医大学长海医院

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2001年11期

【关键词】

：

幽门螺杆菌致病岛基因突变载体构建 PCR Helicobacter pylori pathogenicity island mutation

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为构建中国幽门螺杆菌(Hp)致病岛缺失突变的载体,采用PCR扩增、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切、目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化等多种基因工程技术,将氯霉素抗性基因CmR连接到PCR扩增致病岛两端区域产生的两目的基因片段之间,并共同插入到pBluescript SK-载体的多克隆位点中,经氨苄青霉素抗性筛选及相应的限制性酶切等方法鉴定.构建的突变载体经内切酶酶切分析显示:产生的条带与设计结果完全一致.结果表明已成功地构建了致中国Hp致病岛缺失的突变载体.

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