黄瓜花叶病毒山东株(CMV-SD)RNA2全长cDNA克隆的构建及全序列分析

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yus520
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
分别利用5’RACE和3’RACE确定了CMVSDRNA2的5’和3’末端序列,在此基础上,利用RTPCR得到了RNA2的5’端一半的cDNA克隆pC25和3’端一半的cDNA克隆pC23,并通过拼接构建了RNA2全长cDNA克隆pC2F。通过对pC25和pC23进行序列测定,得到了RNA2的全序列。序列分析结果表明CMVSDRNA2由3048nt组成,其中存在2个部分重叠的阅读框ORF1(79~2652nt)和ORF2(2414~2746nt),分别编码858aa的2a蛋白和111aa的2b蛋白,并在2a蛋白的序列中发现了动植物病毒复制酶所特有的两个保守序列。该株系RNA2核苷酸序列与分属CMVI亚组的Fny株系和II亚组的Q株系RNA2的核苷酸序列同源性分别为917%和756%;2a蛋白的氨基酸序列同源性分别为938%和677%,2b蛋白的氨基酸序列同源性分别为830%和513%。同源性比较的结果表明SD株系属于CMVI亚组。 The 5 ’and 3’ end sequences of CMVSDRNA2 were determined by 5’RACE and 3’RACE respectively. Based on this, RT-PCR was used to obtain the cDNA clone pC25 half of the 5 ’end of RNA2 and half The cDNA clone pC23 was cloned and the RNA2 full-length cDNA clone pC2F was constructed by splicing. By sequencing pC25 and pC23, the full sequence of RNA2 was obtained. The result of sequence analysis showed that CMVSDRNA2 consists of 3048nt, including two partially overlapping reading frames ORF1 (79 ~ 2652nt) and ORF2 (2414 ~ 2746nt), encoding 2a protein of 858aa and 2b of 111aa respectively, Two conserved sequences unique to the plant and animal virus replicase were found in the sequences. The nucleotide sequence of the nucleotide sequence of RNA2 in this strain was 917% and 756% homologous with that of Q strain RNA2 in Fny strain and II subgenome respectively belonging to CMVI subgroup; The amino acid sequence homologies were 938% and 677%, respectively. The homology of 2b protein was 830% and 513% respectively. The results of homology comparison indicated that the SD strain belongs to the CMVI subgroup.
其他文献
色彩的产生是与物理光学及人眼解剖结构有着密切关系的现象。从光与色的关系来看,固有色是不存在的,而绘画教学中固有色的概念一直在延续。色彩教学中关于固有色的理论,给学
黑与白中的无间道曾带给我们无限的遐想,医院中的无间道也并不逊色。然而,在医院营销中运用这一谋略并非易事。噼噼啪啪……正在伏案准备会议提纲的满园芳,被一阵刺耳的鞭炮
一伊曼纽尔·康德[Immanuel Kant]临终的九天前,他的医生来访。衰老、病态和几近失明的康德从扶手椅起身站立,虚弱地颤栗着且咕哝着含糊不清的词语。最后是他那尽职的陪护意
安庆市第一人民医院坐落在风景秀丽的长江之滨,始建于1953年,是皖西南地区集医疗、教学、科研、保健、预防、康复、急救于一体的大型综合医院之一,为安徽医科大学教学医院、
我不止一次说过和写过,我不是一个作家,更不是一个文艺评论者,在半个世纪的岁月中,我只是一个文艺园地里的杂工,干了一些碎活。我喜欢文艺,读了一些书,但这不是有系统的学习
以国内外有代表性的菌系为对照,3 个不同棉种的4 个品种为鉴别寄主研究了棉花黄萎病菌安阳菌系致病类型的变异。结果表明,安阳菌系的致病力类型有明显变异,其AVS菌株的致病力明显强于
教师在生物课堂教学中运用电教手段教学,是改进教学方法、提高教学效率的一种有效途径。同时,一切实物都存在双面性,过度使用电教手段,只会对学生产生消极思想,所以,在初中生
明年我国将实行增值税转型改革,即由生产型增值税改为消费型增值税。就是说,企业生产经营过程中购进固定资产的进项税,由现在的不允许抵扣改为在转型后可以一次全部抵扣。这无疑
目前,我国现行的分级分散国库支付管理制度问题日益突出,改造迫在眉睫,而建立国库集中支付制度是解决这些问题行之有效的措施。尽管我国已在部分地区及局部支出领域进行了有
歌唱的发声,是一种程序性的知识,是一种技能,其本质上是种动觉的艺术。它的形成过程,包含一般运动技能形式的三个阶段,也包含智力技能的策略在其内。第一阶段是对歌唱发声的