【摘 要】
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目的:探讨不同浓度白藜芦醇(Res)对小鼠原代肝细胞脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达水平的影响。方法:采用胶原酶灌注方法,分离培养小鼠原代肝细胞;利用200μmol/L油酸(OA)
【机 构】
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第四军医大学基础部病理学与病理生理学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81070249,31171132)
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目的:探讨不同浓度白藜芦醇(Res)对小鼠原代肝细胞脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达水平的影响。方法:采用胶原酶灌注方法,分离培养小鼠原代肝细胞;利用200μmol/L油酸(OA)刺激小鼠原代肝细胞12 h后,加入0、20、50、100μmol/L白藜芦醇,培养12 h后,采用Bodipy493/503染色,荧光显微镜观察肝细胞内脂滴的形态和数量;采用Folch法抽提细胞内脂类,采用定量试剂盒测定甘油三酯(TG)的含量;采用Western blot法分析脂滴表面蛋白perili-pin、adipophilin、TIP-47的表达水平。结果:与空白对照相比,采用20、50、100μmol/L白藜芦醇处理后均能够降低原代肝细胞内的脂滴大小和数量,定量分析显示细胞内TG含量明显降低,并存在剂量依赖关系,但以50μmol/L浓度效果最为显著。Western blot结果显示,白藜芦醇能够降低原代肝细胞中perilipin、adipophilin和TIP-47的表达水平,其中以perilipin下降最为明显。结论:白藜芦醇能够抑制肝细胞内中性脂肪的储积,以50μmol/L浓度效果最为显著。可能通过调节细胞内脂滴表面蛋白的表达水平,从而影响脂滴的储积。
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