荧光-高效液相色谱法测定血浆中儿茶酚胺类化合物的研究

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:libin101
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血浆中儿茶酚胺类化合物(CAs)与二苯基硼酸-2-氨基乙酯在碱性条件下生成配合物,经液液提取后,与1,2-二苯基乙二胺(DPE)在适宜的条件下发生衍生化反应,生成相应的二苯基喹喔啉衍生物。这些衍生物在岛津Shim-PackCLC-ODS柱上,用甲醇-0.50mol-1Tris-HCI缓冲液等度洗脱,16min能完全分离;在Wa-tersNova-packC18柱上,用甲醇0.01mol.L-1Tris-HCI缓冲液等度洗脱,10min能完全分离;荧光检测波长:ex350nm,em480nm。去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)的检测限分别为10fmol.100ul-1.10fmol.100ul-1和12.5fomol.100ul-1。本方法用于正常人及疾病患者血浆中CAs的测定,均得到满意结果。 The complexes of catecholamines (CAs) and 2-aminoethyl diphenylboronate in alkaline solution were obtained by liquid-liquid extraction and then reacted with 1,2-diphenylethylenediamine (DPE) Under the conditions of derivatization reaction to generate the corresponding diphenylquinoxaline derivatives. These derivatives were isocratically eluted on a Shimadzu Shim-Pack CLC-ODS column with methanol-0.50 mol-1 Tris-HCI buffer and completely separated over 16 min; on a Wa-tersNova-pack C18 column, . L-1Tris-HCI buffer isocratic elution, 10min can be completely separated; fluorescence detection wavelength: ex350nm, em480nm. The limits of detection for norepinephrine (NE), epinephrine (E) and dopamine (DA) were 10 fmol, respectively. 100 ul-1.10 fmol. 100 ul-1 and 12.5 fomol. 100ul-1. The method is applied to the determination of plasma CAs in normal subjects and patients with satisfactory results.
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