人MAGE-3真核表达载体的构建与表达

• 作 者: 吴金民 孙晓东 刘杏娥
• 机 构: 浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心
• 出 处: 实用肿瘤杂志
• 发表日期: 2003年4期
• 关键词: MAGE-3 真核表达载体 构建 表达 黑色素瘤 melanoma/genetics genes expression plasmids cloning mol

目的克隆人黑色素瘤特异性抗原MAGE-3基因,构建真核表达载体,建立MAGE-3阳性细胞株,制备肿瘤核酸疫苗.方法用RT-PCR方法扩增MAGE-3 cDNA,以pcDNA3.1+为载体,构建重组表达质粒pcDNA3.1/MAGE-3.重组质粒用脂质体转染鼠B16细胞,经RT-PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中MAGE-3的表达.结果正确构建了pcDNA3.1/MAGE-3重组质粒,并且在转化细胞中检测到了MAGE-3的表达.结论成功构建了pcDNA3.1/MAGE-3真核表达质粒,建立了稳定