微小RNA-23a在恶性胶质瘤患者血清和肿瘤组织表达及其调控ATP5A1基因表达的作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:houtou27
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

检测微小RNA(miRNA,miR)-23a在恶性胶质瘤(GBM)患者血清和肿瘤组织表达,探讨其在GBM中的功能。

方法

通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测GBM患者血清和肿瘤组织miR-23a表达变化;采用miR-23a mimic转染GBM细胞株U87MG、U251、T98G、A172,并用CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay检测细胞生长,同时测定转染miR-23a mimic的U87MG、U251细胞实体瘤生长;通过RT-qPCR检测GBM患者组织ATP5A1 mRNA表达,免疫组织化学方法检测肿瘤组织ATP5A1蛋白的表达;用miR-23a mimic转染GBM细胞株U87MG、U251、T98G、A172,Western blot检测ATP5A1蛋白的表达变化。

结果

GBM患者血清和肿瘤组织miR-23a表达分别为0.40±0.18和1.00±0.12,明显低于癌旁组织(1.50±0.56)(P=0.005)和健康人血清(2.60±0.45)(P=0.005),同时miR-23a mimic可以抑制GBM细胞株U87MG、U251、T98G、A172的生长以及U87MG、U251实体瘤的生长(P=0.011),U87MG和U251感染pLKO.1慢病毒的细胞实体瘤大小分别为(597.1±95.4) cm3和(429.5±78.7) cm3,感染miR-23a mimic的分别为(153.2±38.6) cm3和(168.7±33.1) cm3(P=0.008);RT-qPCR以及免疫组织化学检测表明ATP5A1(5.4±1.1)在GBM肿瘤组织中表达明显升高,而miR-23a mimic可以降低ATP5A1在GBM细胞株U87MG、U251、T98G、A172中的表达。

结论

miR-23a具有抑制GBM细胞株生长和实体瘤形成的作用,miR-23a可以调节ATP5A1蛋白的表达。

其他文献
下肢动脉狭窄闭塞性病变是临床常见疾病,由于血管闭塞造成患者肢体缺血,引发跛行、组织坏死、截肢等严重影响生活质量的临床症状,随着介入技术和器材的飞速发展,越来越多的患者可以接受微创治疗开通血管、改善组织血供,缓解临床症状,但由于动脉硬化的进展、组织的增生反应、血管本身的弹性回缩等造成的再狭窄、再闭塞一直是困扰临床的主要问题。目前随着生物可降解材料在心血管介入器材领域的发展以及成功应用,我们似乎看到了
目的观察缝隙连接蛋白32(connexin 32)在正常结直肠黏膜、不同病理类型的结直肠腺瘤和结直肠癌组织中表达,探讨其临床意义。方法利用免疫组织化学方法检测connexin 32在80例结直肠腺瘤、60例结直肠癌以及60例正常结直肠黏膜组织中的表达及定位情况;利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测connexin 32 mRNA的表达情况。结果connexin 32的表达与淋巴结转
目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与肺腺癌患者预后的关系,以及NGAL和MMP-9在肺腺癌中的相关性。方法收治50例肺腺癌患者,免疫组织化学法检测肿瘤组织中NGAL和MMP-9的表达,分析NGAL、MMP-9与临床预后的关系以及NGAL与MMP-9的相关性。结果与正常对照人群比较,肺腺癌患者肿瘤组织中NGAL平均表达百分比为70%,MMP-9平均表达
目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度(0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml)及时间梯度(0、6、12、24、48 h)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立内皮细胞损伤模型,并通过Western blot法检测内皮细胞中Kv1.5蛋白水平;分别予以75、125、250、500 mmol/L浓度的Kv
目的观察骨骼肌来源和骨骼肌筋膜来源的间充质干细胞成软骨能力的差异,以期找到合适的种子细胞达到抑制甚至逆转骨性关节炎软骨细胞退变。方法取膝关节置换的患者的髌下骨骼肌组织及骨骼肌筋膜组织,酶消化法原代培养至第3代。波形蛋白(Vimentin)免疫荧光鉴定两种细胞,然后两种细胞进行三维立体培养(3D培养)来模拟体内细胞的生长环境并石蜡切片,阿尔新蓝(Alcian blue)染色研究两种细胞的成软骨能力差
目的观察过表达人Runt相关转录因子3(RUNX3)对腺样囊性癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法利用慢病毒感染腺样囊性癌SACC-83、SACC-LM细胞,获得稳定过表达RUNX3的细胞株(过表达RUNX3组),并设置空白慢病毒感染的阴性对照细胞株(阴性对照组)。用Western blot法检测RUNX3蛋白过表达;采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blo
目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响及其机制。方法分离、培养大鼠VSMC,取对数生长期细胞,利用慢病毒载体感染VSMC,将细胞分为siRNA-EGFR组、siRNA-阴性对照组和空白对照组,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)法检测各转染组细胞增殖能力,Transwell小室和划痕实验检测各转染组细胞迁移能力,实时定量聚合酶
期刊
目的探讨长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA1(FEZF1-AS1)在人胃癌组织中表达及临床意义。方法收集39例胃癌及其配对正常胃黏膜组织,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测组织中FEZF1-AS1表达水平,分析其表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、血管浸润、神经浸润、肝转移数目及肝转移发生时间等临床病理因素关系,并作统计学处理。结
目的探讨联合检测血清微小RNA(miRNA,miR)-100与miR-143水平对膀胱癌的诊断价值。方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测112例膀胱癌患者和100例健康受试者血清中miR-100与miR-143的水平,并应用受试者工作特征(ROC)曲线计算miR-100与miR-143的临界值,并根据此临界值单独或联合检测血清中miR-100与miR-143水平,观察其诊断膀胱