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目的体外原代无血清培养人2型糖尿病皮肤角质形成细胞，并进行纯化。方法采用中性蛋白酶．胰蛋白酶两步消化法分离人2型糖尿病皮肤角质形成细胞，使用无血清培养基进行原代培养，通过两步消化传代纯化细胞，使用倒置相差显微镜观察细胞生长状态，WST-8法测定细胞增殖曲线，流式细胞术检测其表型和纯度。结果无血清培养并纯化的角质形成细胞呈典型的上皮形态，第3代角质形成细胞增殖曲线为S形，对数增长期的平均倍增时间为36．9h，角蛋白阳性率为98．9％。结论建立高纯度的人2型糖尿病皮肤角质形成细胞的无血清培养方法。