【摘 要】
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采用改良的CTAB法提取烟草赤星病菌丝基因组DNA,通过正交与单因素变量设计试验,对烟草赤星病菌ISSR-PCR反应体系的各个影响因素进行优化,建立了适合烟草赤星病菌ISSR分子标记
【机 构】
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云南农业大学植物保护学院农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南省烟草农业科学研究院
【基金项目】
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中烟公司科技计划项目(09YN005),中烟公司科技计划项目(2010YN18),中烟公司科技计划项目(2010YN19)
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采用改良的CTAB法提取烟草赤星病菌丝基因组DNA,通过正交与单因素变量设计试验,对烟草赤星病菌ISSR-PCR反应体系的各个影响因素进行优化,建立了适合烟草赤星病菌ISSR分子标记的最佳反应体系,即在25μL反应体系中包含10×buffer 2.5μL,模板20 ng,Mg2+浓度2.0 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,dNTPs浓度0.2 mmol/L,Taq DNA酶0.75 U。利用所建立的体系对采自云南昆明、德宏、楚雄、曲靖、玉溪等地8份材料进行检验,其结果表明优化后的体系适
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