【摘 要】
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目的探讨双氢青蒿素在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用,并初步研究其可能分子机制。方法 25,50,100,200和400μmol·L-1双氢青蒿素作用SMMC-7721细胞24 h后,采用四甲基
【基金项目】
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吉林省科技发展计划项目资助(20140204002YY);吉林市科技计划项目资助(20156428);吉林省卫计委青年科研课题资助(2015Q041)
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目的探讨双氢青蒿素在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用,并初步研究其可能分子机制。方法 25,50,100,200和400μmol·L-1双氢青蒿素作用SMMC-7721细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测双氢青蒿素对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,激光共聚焦显微镜检测凋亡形态的变化,Rho123染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞内Bcl-2,Bax,Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9和Cyto C蛋白表达变化。结果 MTT实验结果表明,25400μmol·L-1双氢青蒿素对SMMC-7721细胞增殖具有明显的抑制作用。流式细胞仪检测周期结果显示,双氢青蒿素可以使SMMC-7721细胞周期阻滞于G2/M期。Hochest 333258染色结果显示,给药组细胞核出现染色质不均匀,核浓缩聚集、碎裂的凋亡形态。流式细胞仪检测凋亡结果显示,双氢青蒿素给药组细胞凋亡随药物浓度呈现升高趋势（P<0.01）。Rho 123染色结果显示,双氢青蒿素给药组细胞线粒体膜电位呈现明显的下降趋势（P<0.01）。Western blot结果显示,双氢青蒿素给药组细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。结论双氢青蒿素能诱导SMMC-7721细胞凋亡,其凋亡机制可能与线粒体途径相关。
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