鸡传染性支气管炎病毒RT-PCR快速检测方法的建立

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根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列(FJ767920),利用引物软件Premier5.0,设计并合成了1对特异引物,通过RT-PCR扩增条件的优化,建立了一种快速检测IBV的RT-PCR方法。应用该方法成功地从IBV M41和河南株HN99中扩增出318bp的目的片段,而传染性喉气管炎病毒、新城疫病毒及马立克病毒基因组均未扩增出相应的片段。将回收的RT-PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体后测序,进一步证实RT-PCR检测方法的特异性。对IBV的最低检出量为0.6pg的cDNA。经初步应用表明,该方法的建立为IBV的早期诊断和临床检测奠定基础。
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