利用CRISPR-Cas9系统高效创制水稻品系“17318”的OsGW2、OsGN1a基因定向突变体

• 作 者: 周建平 吉琳艺 何瑶 郑雪莲 罗樊 蔡光泽 张勇
• 机 构: 电子科技大学生命科学与技术学院信息生物学中心,西昌学院
• 出 处: 西昌学院学报：自然科学版
• 发表日期: 2018年3期
• 关键词: CRISPR-Cas9 水稻 OsGW2 OsGN1a CRISPR-Cas9 Oryza sativa OsGW2 OsGN1a
• 基金项目: 四川省国际科技合作与交流研发项目（2018HH0112）；四川省青年科学基金项目（2017JQ0005）；中央高校基本科研基金项目 （ZYGX2016J119、ZYGX2016J122）

CRISPR-Cas9系统在水稻功能基因的功能研究、性状改良与分子设计育种中起着重要的作用。本研究成功构建了水稻高效定向敲除OsGW2 和 OsGN1a 的CRISPR/Cas9载体pZJP049。并将该载体通过农杆菌介导转化水稻“17318”愈伤，获得水稻再生苗。PCR扩增的方法进行转基因植株阳性检测，结果显示阳性率为100%。PCR-RFLP结果表明OsGN1a基因位点的突变效率为77.7%。 PCR-SSCP检测结果显示OsGW2基因位点突变率为100%。双基因聚合突变体（gw2gw2gn1agn1