线虫抗凝血蛋白AcaNAP7基因克隆、表达及抗凝活性鉴定

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mnbv808
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目的在大肠杆菌中表达犬钩虫线虫抗凝血蛋白NAP7(AcaNAP7)成熟蛋白,并鉴定表达产物的抗凝活性。方法根据AcaNAP7的核苷酸序列设计引物,从克隆质粒pUCm—T/AcaNAP7中扩增编码AcaNAP7成熟蛋白的基因;扩增产物经双酶切定向克隆到原核表达载体PET-32a中;构建的重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;表达产物经镍琼脂糖凝胶FF纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTF)检测体外抗凝血活性。结果克隆了编码AcaNAP7成熟蛋白的基因并构
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