【摘 要】
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目的原核表达金黄色葡萄球菌Panton—Valentine杀白细胞素(PVL)蛋白,并进行生物学活性鉴定。方法提取PVL阳性金黄色葡萄球菌DNA,利用PCR扩增LukF—PV和LukS—PV编码基因,亚克隆入
【机 构】
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安徽医科大学附属省立医院检验科,教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室
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目的原核表达金黄色葡萄球菌Panton—Valentine杀白细胞素(PVL)蛋白,并进行生物学活性鉴定。方法提取PVL阳性金黄色葡萄球菌DNA,利用PCR扩增LukF—PV和LukS—PV编码基因,亚克隆入表达载体pET28a,转化人大肠埃希菌(Ecoli)B121株,经异丙基-B—D硫代半乳糖苷(1PTG)诱导表达,纯化后获得可溶性的蛋白,Western blot对其鉴定。并以人多形核粒细胞(PMNs)为靶细胞检测其生物学活性。结果成功构建了LukF—PV和LukS—PV基因的表达载体,经IPTG诱导
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