【摘 要】
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目的 分析8B7cDNA编码的蛋白质的性质及其在细胞中的定位.方法 用Blastn、Blastp及Tmpred分析8B7cDNA编码的蛋白质的性质.采用Northern印迹分析8B7mRNA在细胞和组织中的表达.
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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目的 分析8B7cDNA编码的蛋白质的性质及其在细胞中的定位.方法 用Blastn、Blastp及Tmpred分析8B7cDNA编码的蛋白质的性质.采用Northern印迹分析8B7mRNA在细胞和组织中的表达.构建重组定位表达载体,转染COS-7细胞,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞中EGFP-8B7融合蛋白的表达.结果 8B7cDNA编码的蛋白质长363个氨基酸,分子中有血影蛋白重复序列,它与Enaptin蛋白、Nasprin-1蛋白、Myne 1蛋白及Syne-1蛋白的C末端363个氨基酸序列100%同源,是血影蛋白家族的一个新成员,故称8B7血影蛋白.Northern印迹分析,可见人脾脏和小肠组织有1.8kb的8B7mRNA表达.定位实验见COS-7细胞的核膜有荧光,胞浆中也见网状的荧光.转染pEGFP-△SR8B7的COS-7细胞中发射荧光的部位与转染pEGFP-8B7cDNA的细胞相似.结论 8B7cDNA编码的蛋白质是血影蛋白家族的一个新成员,用COS-细胞所做的定位实验证实其定位于细胞的核膜和胞浆中的网状结构,是8B7血影蛋白C端的KASH结构域决定了其在COS-7细胞中的定位.
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