志贺氏菌可视浊度/荧光环介导等温扩增方法的建立

• 作 者: 贺生芳 郭澍强 谈静惠 马晓花 杨旭光 郝俊虎
• 机 构: 银川海关综合技术中心
• 出 处: 中国动物检疫
• 发表日期: 2019年5期
• 关键词: 志贺氏菌 环介导等温扩增 荧光 浊度 Shigella loop-mediated isothermal amplification assay(LAMP) f
• 基金项目: 国家重大科学仪器设备开发专项(2012YQ090197).

为给实验室和现场检测提供一种快速且易于操作的志贺氏菌检测方法,通过将LAMP技术分别与荧光检测技术和浊度检测技术相结合,建立了灵敏、特异、准确的可视浊度/荧光环介导等温扩增(LAMP)检测方法。根据志贺氏菌基因保守序列,利用LAMP在线软件设计4条最佳引物,通过优化反应温度,分别建立了可视浊度环介导等温扩增检测方法(LAMP-浊度)以及可视荧光环介导等温扩增检测方法(LAMP-荧光),并分析所建立的两种方法的特异性和灵敏度。结果显示:所建立的LAMP-浊度方法最适反应温度是63℃,菌液灵敏度为13.6cf