【摘 要】
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目的 评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白CagA对胃上皮细胞线粒体功能的影响.方法 用Ca gA基因失活突变Hp菌株(1004Hp△cagA)和野生型1004Hp菌株分别感
【机 构】
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贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室,贵州医科大学分子生物学重点实验室,贵州贵阳550004
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目的 评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白CagA对胃上皮细胞线粒体功能的影响.方法 用Ca gA基因失活突变Hp菌株(1004Hp△cagA)和野生型1004Hp菌株分别感染人胃上皮细胞GES-1和AGS 24 h,收集标本.Western blot检测各组细胞中CagA蛋白、线粒体融合分裂蛋白Mfn1、Mfn2、Fis1和Drp1的表达情况;加入JC-1荧光探针后,荧光显微镜观察各组细胞线粒体膜电位变化;ATP检测试剂盒检测各组细胞中ATP生成水平的变化. 结果 Western blot鉴定显示野生型1004Hp中有CagA的表达,而1004Hp△cagA无CagA的表达.1004Hp感染组与1004Hp△cagA感染组比较,线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2表达下降(P＜0.05),线粒体分裂蛋白Fis1、Drp1表达上升(P＜0.05),线粒体膜电位下降,且在GES-1和AGS两株细胞结果一致.1004Hp感染组和1004Hp△cagA中AGS和GES-1细胞ATP相对生成量分别为0.30±0.03、0.64±0.04和0.64±0.01、1.23±0.19,AGS中1004 Hp感染组较1004 Hp△cagA感染组ATP生成水平下降53.1％,GES-1中1004 Hp感染组较1004 Hp△cagA感染组ATP生成水平下降48.0％ (P＜0.05). 结论 Hp/cagA影响线粒体动态平衡,诱发功能障碍,可能是Hp引起胃部病理变化的原因之一.
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