MLN4924对人肝癌细胞HepG2侵袭和迁移的影响及其机制

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目的

观察选择性NEDD8活化酶(NAE)抑制剂MLN4924对人肝癌细胞HepG2侵袭和迁移的影响,探讨其相关机制。

方法

将肝癌细胞株HepG2、Hep3B、SMMC-7721分别分为对照组与MLN4924干预组。细胞毒性/增殖检测试剂盒(CCK-8)方法检测细胞活性及半抑制浓度(IC50)值,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,细胞划痕和Transwell实验检测MLN4924对细胞侵袭和迁移的影响,Western blot法检测上皮-间充质转化(EMT)中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达变化。

结果

CCK-8方法发现3种肝癌细胞均受到抑制,其中HepG2对MLN4924敏感,IC50值为3.34 μmol/L。流式细胞仪测得MLN4924能够明显促进肝癌细胞HepG2凋亡,细胞划痕实验和Transwell实验证实MLN4924能够明显抑制肝癌细胞HepG2侵袭和迁移,并且具有剂量依赖性(P=0.001)。此外,用0.5、1.0、2.0、4.0 μmol/L的MLN4924处理24 h后E-cadherin相对蛋白表达量分别为0.313±0.005、0.594±0.016、0.431±0.002、0.780±0.019、1.000±0.015,Vimentin相对蛋白表达量分别为1.000±0.012、1.158±0.035、1.087±0.076、0.635±0.028、0.351±0.010。

结论

MLN4924可抑制肝癌细胞HepG2的增殖,促进其凋亡,并通过EMT抑制了肝癌细胞HepG2的侵袭和迁移。

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